Existen dos instrumentos generales para medir la fluorescencia, que son los fluorómetros y los espectrofluorómetros, en este artículo nos centraremos en las diferencias entre ambos equipos.
La fluorescencia puede definirse como un tipo de luminiscencia que se da en sustancias gaseosas, líquidas o sólidas, capaces de absorber radiación electromagnética (por ejemplo, la luz) y de emitir parte de esa energía como radiación de una longitud de onda distinta de la absorbida.
¿Qué es un fluorómetro?
Un fluorómetro es un instrumento que utiliza filtros ópticos para aislar la luz incidente y la luz fluorescente, y mide la capacidad de la muestra para absorber luz a una longitud de onda y emitir luz a una longitud de onda más larga.
En estos dispositivos, una fuente de radiación (luminosa) emite luz de una longitud de onda de excitación para el compuesto que se va a medir o analizar. La excitación del compuesto a analizar se produce a través del uso de filtros ópticos, que actúan bloqueando otras longitudes de onda y transmitiendo la longitud de onda apropiada para producir la excitación del compuesto. La luz generada por la fuente de radiación pasa a través de la muestra a medir, y una cierta cantidad de longitud de onda es absorbida, mientras que luego se emite a una longitud de onda más larga. Esta luz emitida es medida por un detector.
Los fluorómetros son altamente sensibles, y los filtros ópticos utilizados por ellos son generalmente baratos y fáciles de cambiar. Esto hace que los fluorómetros sean ampliamente utilizados en la investigación científica y experimental, y con fines académicos.
¿Qué es un espectrofluorómetro?
Los espectrofluorómetros son equipos utilizados para analizar la fluorescencia de una muestra. Emplean monocromatores de difracción de rejilla para aislar luz incidente y luz fluorescente. Por lo general, utilizan monocromatadores de excitación, que incluyen un dispersor de longitud de onda y un monocromator de emisión.
Estos equipos tienen cuatro componentes principales: una fuente de radiación (lámpara de xenón o láser), un monocromator de excitación (responsable de seleccionar la longitud de onda apropiada para la excitación de la muestra), un monocromator de emisión (que analiza las emisiones producidas por la fluorescencia emitida por la muestra) y un fotodetector que recibe las ondas de luz y las transforma en una unidad medible proporcional a la intensidad de la luz recibida.
Entre las ventajas de un espectrofluorómetro es que permiten seleccionar una longitud de onda variable, pero son mucho más caros que los fluorómetros y solo pueden proporcionar sensibilidad y especificidad moderadas.
Los espectrofluorómetros se utilizan en la investigación de cinética de reacción, investigación fotoquímica en sistemas biológicos, calidad del agua, control de calidad del vino, estudios de luminiscencia y fotoluminiscencia.
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